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芒果叶资源十分丰富

芒果叶为漆树科植物芒果(MangiferaindicaL)的面法芒果树叶,含有芒果苷、优化叶多异芒果苷、浸提金丝桃苷、工艺槲皮素、面法芒果没食子酸、优化叶多原儿茶酸等大量多酚类化合物,浸提在抗氧化、工艺抗菌、面法芒果镇痛、优化叶多防晒等方面作用显著,浸提有疏风止咳、工艺防晕止吐、面法芒果降低胆固醇、优化叶多美容美颜、浸提治疗皮肤瘙痒、消积化食等效果。芒果叶资源十分丰富,但是利用率低,在食品、医药领域有很大的开发应用价值。其中多酚的提取方法主要有微波提取和超声提取等方法,工艺优化多采用正交实验,虽然这些提取方法效率较高,工艺优化相对简单,但是由于多酚类遇热易氧化失去活性,正交试验不能给出模型参数和实验预测值。因此本实验采用浸提法,以单因素试验和响应面法优选芒果叶多酚的最佳提取工艺,为综合开发利用芒果叶提供参考。

一、仪器与实验材料

1、仪器

UV-762型紫外可见分光光度计(上海佑科仪器仪表有限公司);FA1004B电子精密天平(上海越平科学仪器有限公司);DZF-6020型真空干燥箱(上海琅轩实验设备有限公司);DZKW-D-2型智能数显恒温水浴箱(北京市永光明医疗仪器厂);RE-52旋转蒸发仪(上海亚荣生物仪器厂);SHB-Ⅲ型循环水式多用真空泵(郑州长城科工贸有限公司)。

2、实验材料

焦性没食子酸对照品(质量分数≥99%,成都埃法生物科技有限公司);芒果叶(采自广西南宁,经西安医学院药学院关丽博士鉴定为漆树科植物芒果MangiferaindicaL的树叶);水为超纯水,其他试剂均为分析纯。

二、结果与分析

1、多酚标准曲线的绘制

精密称取焦性没食子酸对照品10.50mg于100mL容量瓶,加50%乙醇溶解并定容至刻度,摇匀,即为对照品储备溶液(0.1050mg/mL)。精密吸取5mL对照品溶液于25mL容量瓶中,加入4mL蒸馏水和5mL酒石酸亚铁溶液,用pH7.5的NaH2PO4-NaHPO4缓冲溶液定容至刻度,室温静置5min后紫外可见光谱扫描,最大吸收波长为540nm。

精密吸取对照品储备溶液0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0、8.0、9.0mL于25mL量瓶,分别加入4mL蒸馏水和5mL酒石酸亚铁溶液,用pH7.5的NaH,PO4-Na2HPO4缓冲溶液定容至刻度,配制成0.0126、0.0168、0.0210、0.0252、0.0294、0.03361、0.0378mg/mL系列标准溶液,以试剂空白作对照,540nm测定吸光度。以焦性没食子酸浓度C为横坐标,吸光度A为纵坐标进行线性回归,得回归方程为A=19.481C-0.0134,r=0.9998,在0.0126~0.0378mg/mL范围内焦性没食子酸浓度与吸光度呈良好的线性关系。

2、多酚含量测定,

将芒果叶洗净晾干研磨成粗粉,装入索氏提取器中,加入石油醚连续回流脱色至回流液近无色,将脱色后的芒果叶粗粉晾干备用。取上述芒果叶粗粉按实验条件浸提后抽滤,滤液稀释至适宜浓度,依照标准曲线绘制方法显色后测定吸光度,代入回归方程中计算样品中多酚含量。

3、单因素试验

(1)浸提时间对多酚含量的影响

精密称取1.00g脱色后的芒果叶粗粉5份,在乙醇浓度为60%,料液比1:20,60℃的条件下分别浸提0.5、1、1.5.2、2.5h,将芒果叶洗净晾干研磨成粗粉,装入索氏提取器中,加入石油醚连续回流脱色至回流液近无色,将脱色后的芒果叶粗粉晾干备用。取上述芒果叶粗粉按实验条件浸提后抽滤,滤液稀释至适宜浓度,依照标准曲线绘制方法显色后测定吸光度,代入回归方程中计算样品中多酚含量。测定芒果叶中多酚的含量,浸提时间与多酚含量的关系见图1。

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由图1可见随着浸提时间的增加,多酚含量先增加而后降低,当浸提时间为1.5h时,多酚含量达到最大值,因此选取1.5h为宜。

(2)料液比对多酚含量的影响

精密称取1.00g脱色后的芒果叶粗粉5份,在料液比分别为1:10、1:20、1:30、1:40、1:50,乙醇浓度为60%,60℃的条件下分别浸提1.5h,按照2.2方法测定芒果叶中多酚的含量,料液比与多酚含量的关系见图2。由图2可见芒果叶中多酚的含量随着料液比的增大先增大后减小,可能是因为随着溶剂用量增加,多酚溶解度增大,但溶剂量过大又会减弱体系的传质和传热,不利于提取。在料液比为1:30时,多酚含量达到最大,因此选取料液比1:30浸提。

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